等度液相色譜分析儀是一種高效液相色譜儀（HPLC）的類型，它利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對樣品中的化合物進(jìn)行分離和分析。在等度液相色譜中，流動(dòng)相的組成和比例在分析過程中保持恒定，因此得名“等度”。

　　等度液相色譜分析儀的工作原理基于樣品分子在固定相和流動(dòng)相之間的分配和吸附作用。樣品溶液被注入色譜柱后，樣品中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同，它們在色譜柱中的移動(dòng)速度也會(huì)不同，從而實(shí)現(xiàn)組分的分離。分離后的組分依次進(jìn)入檢測器，檢測器將樣品組分的信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，經(jīng)過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和分析，最終生成分析報(bào)告。

　　等度液相色譜分析儀在使用過程中可能會(huì)出現(xiàn)多種問題，以下是一些常見問題及相應(yīng)的解決方法：

　　一、壓力問題

　　壓力過高

　　原因分析

　　管路堵塞：樣品中的顆粒雜質(zhì)、流動(dòng)相中的沉淀物或者鹽類結(jié)晶等都可能堵塞管路，導(dǎo)致壓力升高。

　　保護(hù)柱或色譜柱堵塞：長期使用后，保護(hù)柱和色譜柱內(nèi)可能積累雜質(zhì)，引起柱壓上升。

　　泵內(nèi)有氣泡：泵內(nèi)進(jìn)入空氣，會(huì)使泵工作不正常，導(dǎo)致壓力波動(dòng)和升高。

　　流速設(shè)置過高：超出了系統(tǒng)所能承受的壓力范圍。

　　解決方法

　　清理管路：用合適的溶劑沖洗管路，如甲醇、水等，如果堵塞嚴(yán)重，可以卸下管路清洗。

　　更換保護(hù)柱或色譜柱：當(dāng)柱壓明顯升高且經(jīng)過清洗無效時(shí)，考慮更換保護(hù)柱或色譜柱。注意選擇合適的規(guī)格和型號(hào)，以確保與儀器匹配。

　　排除泵內(nèi)氣泡：打開泵的排氣閥，用注射器或相關(guān)設(shè)備將氣泡排出。同時(shí)檢查流動(dòng)相的脫氣情況，確保脫氣裝置正常工作。

　　調(diào)整流速：降低泵的流速，使其在系統(tǒng)正常的工作壓力范圍內(nèi)。

　　壓力過低

　　原因分析

　　管路泄漏：管路接口松動(dòng)、密封件損壞等可能導(dǎo)致液體泄漏，從而使壓力降低。

　　泵故障：泵的活塞密封損壞、單向閥故障等會(huì)導(dǎo)致泵無法正常輸出壓力。

　　流動(dòng)相不足：流動(dòng)相儲(chǔ)液罐內(nèi)液體不足，或者流動(dòng)相的粘度過低，也可能導(dǎo)致壓力下降。

　　解決方法

　　檢查并修復(fù)管路泄漏：緊固松動(dòng)的接口，更換損壞的密封件，確保管路系統(tǒng)的密封性。

　　維修或更換泵部件：如果發(fā)現(xiàn)泵有故障，及時(shí)聯(lián)系儀器維修人員，對泵的活塞密封、單向閥等部件進(jìn)行維修或更換。

　　補(bǔ)充流動(dòng)相或更換合適的流動(dòng)相：確保流動(dòng)相儲(chǔ)液罐內(nèi)有足夠的液體，并根據(jù)需要選擇合適的流動(dòng)相，避免使用粘度過低的流動(dòng)相導(dǎo)致壓力不足。

　　二、峰形問題

　　峰形拖尾

　　原因分析

　　色譜柱性能下降：長期使用或不當(dāng)使用使色譜柱的分離能力下降，導(dǎo)致峰形拖尾。

　　樣品過載：進(jìn)樣的樣品量超過了色譜柱的承載能力，使峰形展寬并拖尾。

　　流動(dòng)相不合適：流動(dòng)相的pH值、極性等參數(shù)不合適，影響了樣品的保留行為和峰形。

　　解決方法

　　再生或更換色譜柱：根據(jù)色譜柱的使用情況和廠家建議，對色譜柱進(jìn)行再生處理，如用合適的溶劑沖洗、調(diào)整流動(dòng)相條件等。如果色譜柱性能嚴(yán)重下降，考慮更換新的色譜柱。

　　減少進(jìn)樣量：通過適當(dāng)稀釋樣品或減小進(jìn)樣體積，使進(jìn)樣量在色譜柱的線性范圍內(nèi)，以改善峰形。

　　優(yōu)化流動(dòng)相條件：調(diào)整流動(dòng)相的pH值、極性、離子強(qiáng)度等參數(shù)，通過實(shí)驗(yàn)選擇適合樣品分離的流動(dòng)相條件。

　　峰形前沿

　　原因分析

　　進(jìn)樣技術(shù)問題：進(jìn)樣速度快、進(jìn)樣量大且進(jìn)樣體積不準(zhǔn)確等因素可能導(dǎo)致峰形前沿。

　　色譜柱老化：色譜柱使用時(shí)間過長，固定相流失，使峰形發(fā)生變化。

　　流動(dòng)相線速度不均勻：泵的脈沖或管路系統(tǒng)中的死體積等因素可能導(dǎo)致流動(dòng)相線速度不穩(wěn)定，出現(xiàn)峰形前沿。

　　解決方法

　　改進(jìn)進(jìn)樣技術(shù)：控制進(jìn)樣速度，使其緩慢而穩(wěn)定地進(jìn)入色譜柱，確保進(jìn)樣體積準(zhǔn)確。可使用高精度的進(jìn)樣器或自動(dòng)進(jìn)樣器來提高進(jìn)樣的準(zhǔn)確性。

　　更換色譜柱：如果色譜柱老化嚴(yán)重，考慮更換新的色譜柱以恢復(fù)其分離性能。

　　優(yōu)化流動(dòng)相系統(tǒng)：減少泵的脈沖，可通過調(diào)整泵的參數(shù)或增加脈動(dòng)阻尼器來實(shí)現(xiàn)。同時(shí)，優(yōu)化管路設(shè)計(jì)，減少死體積，使流動(dòng)相線速度更加均勻。

　　三、保留時(shí)間問題

　　保留時(shí)間縮短

　　原因分析

　　流動(dòng)相極性改變：流動(dòng)相中有機(jī)溶劑的比例增加或水的純度變化，可能使流動(dòng)相的極性發(fā)生變化，導(dǎo)致樣品的保留時(shí)間縮短。

　　色譜柱溫度升高：如果柱溫沒有得到有效控制，溫度升高會(huì)使樣品在色譜柱上的保留時(shí)間縮短。

　　色譜柱損壞：色譜柱內(nèi)的固定相流失或柱床結(jié)構(gòu)破壞，會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間不規(guī)律地縮短。

　　解決方法

　　調(diào)整流動(dòng)相組成：重新配制流動(dòng)相，確保有機(jī)溶劑和水的比例準(zhǔn)確，并使用高純度的溶劑。如果懷疑是流動(dòng)相極性變化導(dǎo)致的保留時(shí)間變化，可以通過實(shí)驗(yàn)逐步調(diào)整流動(dòng)相的組成，找到合適的配比。

　　控制柱溫：檢查柱溫箱的工作狀態(tài)，確保其溫度穩(wěn)定在設(shè)定的范圍內(nèi)。如果柱溫箱出現(xiàn)故障，及時(shí)維修或更換。

　　更換色譜柱：如果色譜柱損壞嚴(yán)重，考慮更換新的色譜柱。在選擇色譜柱時(shí)，要根據(jù)樣品的性質(zhì)和分析要求選擇合適的類型和規(guī)格。

　　保留時(shí)間延長

　　原因分析

　　流動(dòng)相流速降低：泵的故障、管路堵塞或流動(dòng)相粘度增加等原因可能導(dǎo)致流動(dòng)相流速減慢，從而使保留時(shí)間延長。

　　色譜柱污染：樣品中的雜質(zhì)在色譜柱上積累，或者流動(dòng)相中的雜質(zhì)吸附在色譜柱上，會(huì)使色譜柱的保留時(shí)間逐漸延長。

　　柱溫過低：如果柱溫低于預(yù)期，樣品在色譜柱上的傳質(zhì)速率會(huì)變慢，導(dǎo)致保留時(shí)間延長。

　　解決方法

　　增加流動(dòng)相流速：檢查泵的工作狀態(tài)，維修或調(diào)整泵的參數(shù)，使流速恢復(fù)到正常范圍。同時(shí)，檢查管路是否堵塞，如有堵塞及時(shí)清理。如果流動(dòng)相粘度過高，可以考慮更換低粘度的流動(dòng)相或提高柱溫。

　　清洗色譜柱：用合適的溶劑對色譜柱進(jìn)行清洗，去除柱上的污染物。對于污染嚴(yán)重的色譜柱，可以進(jìn)行柱頭清洗或使用專門的色譜柱再生方法。

　　提高柱溫：檢查柱溫箱的設(shè)置和工作狀態(tài)，確保其溫度符合分析要求。如果是柱溫過低導(dǎo)致的保留時(shí)間延長，可以適當(dāng)提高柱溫。

　　四、檢測器問題

　　紫外-可見檢測器噪聲大

　　原因分析

　　光源不穩(wěn)定：氘燈或鎢燈的使用壽命接近極限，或者電源電壓不穩(wěn)定，會(huì)導(dǎo)致光源強(qiáng)度波動(dòng)，產(chǎn)生噪聲。

　　流通池污染：流通池內(nèi)有雜質(zhì)或沉積物，會(huì)影響光的傳播，導(dǎo)致檢測信號(hào)不穩(wěn)定。

　　檢測器的電子元件故障：如放大器、濾波器等電子元件故障，可能會(huì)導(dǎo)致噪聲增大。

　　解決方法

　　更換光源：如果光源使用壽命已到，及時(shí)更換新的氘燈或鎢燈。同時(shí)，檢查電源電壓，確保其穩(wěn)定在正常范圍內(nèi)。

　　清洗流通池：用合適的溶劑和柔軟的布擦拭流通池，去除池內(nèi)的雜質(zhì)和沉積物。如果流通池污染嚴(yán)重，可以將流通池拆卸下來進(jìn)行超聲清洗。

　　維修或更換電子元件：如果確定是檢測器的電子元件故障，請聯(lián)系專業(yè)的維修人員進(jìn)行維修或更換。

　　檢測器靈敏度下降

　　原因分析

　　流通池被污染：與噪聲大類似，流通池內(nèi)的污染物會(huì)吸收部分光線，導(dǎo)致檢測到的信號(hào)減弱，從而使靈敏度下降。

　　檢測器的光學(xué)部件對準(zhǔn)不良：例如，光源與流通池、流通池與檢測器之間的光學(xué)連接出現(xiàn)偏差，會(huì)使光線傳播效率降低，影響靈敏度。

　　檢測器的參數(shù)設(shè)置不合理：如增益、波長等參數(shù)設(shè)置不當(dāng)，可能導(dǎo)致檢測器的靈敏度不能達(dá)到最佳狀態(tài)。

　　解決方法

　　清洗流通池：按照前面介紹的方法清洗流通池，確保光路暢通。

　　調(diào)整光學(xué)部件對準(zhǔn)：檢查光源、流通池和檢測器之間的光學(xué)連接，確保它們正確對準(zhǔn)。如果需要，可以使用專業(yè)的工具進(jìn)行調(diào)整。

　　優(yōu)化檢測器參數(shù)：根據(jù)實(shí)際情況，調(diào)整檢測器的增益、波長等參數(shù)，通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的參數(shù)設(shè)置，以提高檢測器的靈敏度。